构成孢子培养基的原材料，其产地、品种、加工方法和用量对孢子质量都有一定的影响。为了保证孢子培养基的质量，斜面培养基所用的主要原材料，糖、氮、磷含量需经过化学分析及摇瓶发酵试验合格后才能使用。制备培养基时要严格控制灭菌后的培养基质量。斜面培养基使用前，需在适当温度下放置一定的时间，使斜面无冷凝水呈现，水分适中有利于孢子生长。
⒉培养温度和湿度
微生物在一个较宽的温度范围内生长。但是，要获得高质量的孢子，其适温度区间很狭窄。一般来说，提高培养温度，可使菌体代谢活动加快，缩短培养时间，但是，菌体的糖代谢和氮代谢的各种酶类，对温度的敏感性是不同的。因此，培养温度不同，菌的生理状态也不同，如果不是用适温度培养的孢子，其能力就会下降。
⒊培养时间和冷藏时间
丝状菌在斜面培养基上的生长发育过程可分为五个阶段：
①孢子发芽和基内菌丝生长阶段；
②气生菌丝生长阶段；
③孢子形成阶段；
④孢子成熟阶段；
⑤斜面衰老菌丝自溶阶段。
斜面孢子的冷藏时间，对孢子质量也有影响，其影响随菌种不同而异，总的原则是冷藏时间宜短不宜长。