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ATCC细胞血清培养方法

2024/10/19 2:46:47发布36次查看
atcc细胞的培养都是在dmem/f12基础培养基中添加5~10的小牛血清(用于重组蛋白)或胎牛血清(用于杂交瘤)单抗来完成的,血清除了供给细胞的营养成分外,还能促进细胞开始合成dna,对细胞的增殖有很大的作用。实验证明,血清在细胞的体外培养中提供了细胞增殖所必需的生长因子。但哺乳动物的血清价格昂贵,成本高不适于今天的大规模工业化。而且哺乳动物血清作为补加物,存在许多问题,首先血清的来源存在问题,血清来源于特定的地区,因而如果该地区发生灾荒或牛群中流行疾病,都可导致血清失去供应源。血清批量之间的差异大,重复性差,由于血清来源于动物,动物个体或群体的差异及时间上的差异都能导致每个批号的血清不*一样。
atcc细胞从重组蛋白的角度来看,出于q和qc的要求,每换一个批号的血清,都包含大量的验证工作,这就给带来很大的麻烦。另外血清来源于动物因此经常被污染,污染的血清往往导致细胞生长缓慢,蛋白产量下降,甚至导致细胞死亡。目前购自各大公司的血清虽能消灭细菌和所有支原体,但很难保证除去所有的病毒污染。血清的成分十分复杂,经研究表明,血清除含有促进生长的活性成分外,还含有一定的细胞毒性物质和抑制物质,对细胞有去分化作用,影响atcc细胞功能的表达 血清复杂的成分也给基因工程表达产物的下游工作带来很大的困难,因此成分明确,价格经济的无血清培养基成为cho细胞培养的一种必然需求。
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