1.使用前的准备：内清洗干净，检查进气阀及排气阀是否灵活有效，并加入适量水。
2.装放物：将待的物品放入内，注意不要放得太挤，以免影响蒸汽的流通和效果。然后加盖旋紧螺旋，密封。
3.预热及排气：加热升温使水沸腾，并由小至大打开排气管（排气阀），排除冷空气，继续加热升温，再关闭排气管（阀）。
4.升压保温：让温度随蒸汽压力增高而上升待压力逐渐上升，待蒸汽压力升至所需压力（一般为103.43kpa，温度则相当于121.3℃）时，控制热源，维持所需时间，持续15～20min即可达到目的。
5.降压开盖取物：保压到规定时间之后，就停止加热，缓缓排气，待其压力下降至零时，方可开盖取物。
6.注意事项
⑴此法是否*的一个关键是压力上升之前，必须先把蒸汽锅内的冷空气*驱尽，否则，即使压力表已指到103.43kpa，而锅内温度则只有100℃，这样芽孢则不能被杀死，造成不*，所以必须进行排气。
⑵降压一般通过自行冷却。如果时间来不及，可以稍开排气阀降压，但排气阀不能开得太大，排气不能过急，否则内骤然降压，物内的液体会突然沸腾，将棉塞冲湿，甚至外流。另外，降压时压力表上读数虽已降至“0”时，物内温度有时还会在100℃以上，如果开锅太快还有沸腾的可能，所以在降压后再稍停一会，物温度下降后再出锅较妥当。物后仍处于高温时，容器内呈真空状，降温过程中外部空气要重新进入容器。一般叫“回气”，降温过快，回气就急，如棉塞不严密，空气中杂菌就会重新进入物使其污染，这往往造成高压蒸汽灭菌的失败。因而降压开盖取物不宜过急。