可爱的春姑娘,迈着轻盈的步子来到人关于爱情的句子间,那一片生机的景象便随之来到四面八方,整个世界像刚从一个漫长的睡梦中苏醒过来。接下来介绍
细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1ml细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4ml培养基的15ml离心管中混 合均匀。在1000rpm条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1ml培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换 液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的pbs润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%trypsin-0.53mm edta)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000rpm条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1ml培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的t-25培养瓶中或含有14ml培养基的t-75培养瓶中培养。
