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反相液相色谱结合柱前衍生化法测定人血清中L-

2024/7/31 15:25:17发布47次查看
氨基酸是蛋白质的基本结构单位,是人体完成生理功能的必须物质,人类许多疾病的发生和发展与血液循环中氨基酸的变化有密切联系。因此,血液中氨基酸水平在临床中可作为一些疾病的诊断指针。监测体内氨基酸水平的变化,对疾病的诊断和治疗有重要参考价值。
是机体合成蛋白质的重要氨基酸之一,在体内可水解为和氨,体内正常细胞也可通过合成酶合成l-asn。1996年,yellin and wriston研究发现淋巴瘤细胞中合成酶活性低,不能合成足够的l-asn,必须从血液循环只能获取l-asn以合成蛋白质,酶能催化l-asn水解,迅速耗竭血液循环中的l-asn,使肿瘤细胞不能获得足够的l-asn导致蛋白合成抑制而凋亡,故酶对淋巴瘤细胞有选择性细胞毒作用。目前,天然的火聚乙二醇修饰的asnase已成为儿童急性淋巴细胞白血病联合方案中的重要组成部分,对维持患儿持续*缓解(ccr)起着不可替代的作用。
本文建立网络邻苯二甲醛柱前在线衍生反相液相色谱法,在方法学建立时采用l-asn耗竭空白人血清作为空白生物基质,能够快速、准确测定人血清中l-asn,在临床研究中可用于监测asnase治疗过程中患儿体内l-asn的耗竭程度,为优化给药方案,降低不良反应提供重要依据。
仪器准备
仪器简介
lc-600a智能全控液相色谱系统由p600高压恒流泵与uv600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用ws600工作站可以同时控制数台p600高压恒流泵、uv600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
应用领域
化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析
色谱条件:
色谱柱
agilent zorbax zclipse aaa(4.6mm×150mm,5μm)
流动相
a:0.01mol.l磷酸盐缓冲液(ph=7.8)
b:水-甲醇-乙腈(10:45:45)
梯度洗脱程序
0-17min,29%b,18-32min,99%b,33-37min,29%b;
进样量
15μl
流速
1ml/min
测定结果:
关键词:紫外检测器 色谱柱
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