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细胞冻存液氮罐的具体操作步骤和细胞复苏流程

2024/7/23 12:36:42发布29次查看
细胞冻存液氮罐的具体操作步骤和细胞复苏流程大量细胞如何储存在液氮罐里,液氮罐里一般灌有低温液氮,细胞的储存需要低温环境,放入-196度的液氮里对细胞是*保存的一个适合的环境。细胞冻存液氮罐是将细胞存入液氮罐的液相里储存,有的方形抽屉式提篮,2ml冻存管放入冻存盒然后再放入提篮后浸入液氮里,*浸入。使细胞*处于液氮-196度环境下,才能够*保存细胞。
细胞冻存液氮罐的具体操作步骤:
1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化,或分离获得原代细胞后,收集于离心管中。
2、使用离心机离心,去除上清,收集细胞沉淀。
3、根据细胞生长密度加入适量的livecytetm细胞冻存液进行重悬,充分混匀。
4、将细胞悬液分装至冻存管中,直接放置于-80°c冰箱保存。24小时后可移入液氮*保存(可选)。
细胞冻存液氮罐的细胞复苏流程:
1、从-80°c冰箱或液氮罐中取出细胞。
2、迅速放入37°c水浴,并不时摇动,在3分钟之内使其*融化。
3、在冻存管中加入少量*培养基,再将细胞混合液移入含有该细胞*培养基的离心管中,样品和培养基比例为1:10,然后轻轻吹打,混合均匀。
4、离心后去除上清,收集细胞沉淀。
5、轻轻弹松细胞沉淀,加入适量培养液后接种于培养瓶或培养皿中,轻轻晃动使细胞分布均匀,置于37℃孵箱中培养。
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