艾美捷双链特异性dna酶:
cat #: c-bsm0206
size: 50 rxns
storage: -20°c
酶活性定义:
根据kunitz测定方法,在25°c的ph 5.0下,当使用过量的高分子量dna作为底物,酶活性在每分钟260 nm处导致吸光度增加0.001时,酶活性定义为1个单位(u)。
储存缓冲液:
25 mm tris-hcl(ph 7.5,在25°c下)、2.0 mm mgcl2、10 mm nacl、0.01%(v/v)triton x-100、50%(v/v)甘油。
抑制和灭活
抑制作用:金属离子、edta、sds、dtt、β-巯基乙醇、高盐离子浓度等均可抑制
dsdna酶。
灭活:在55°c下培养5分钟。
质量控制
蛋白质纯度
经sds-page和考马斯亮蓝染色测定,酶纯度≥90%。
rna核酸酶活性
将酶与rna底物在37°c下孵育1小时,并进行凝胶电泳以确认rna底物的节点降解。
功能测试
该产品测试了从rna样品中去除基因组dna和随后的rt-qpcr扩增,显示去除率≥99.9%。rna的数量不受dsdna酶处理的影响。
双链特异性dna酶使用说明:
1.在冰上按如下方式制备反应混合物:
2.轻轻拍打并混合反应混合物,然后将混合物在37°c下孵育2-5分钟。
3.在65°c下加热灭活2分钟,并迅速将获得的rna放在冰上进行后续实验。对于长期储存,应在-80°c下储存,避免重复冻融循环
备注
1.如果rna样品的下游应用是rt-pcr,并且靶基因长度≥3kb,则在灭活步骤之前添加最终浓度为10mm的dtt。
2.为了防止rna降解,在反应混合物中加入适量的rnase抑制剂。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
