1 材料
agilent 1260 型高效液相色谱仪 ( 美国 agilent 公司) ; aｒ2140 型电子天平 ［梅特勒-托利多仪器 ( 上海) 有 限 公 司］; voｒtex-5 型 涡 旋 混 合 器 ( 海门市其林贝尔仪器制造有限公司) ; jy92-ii 型 超声仪 ( 宁波新知科仪器研究所) ; yc-1200 型台 式冷冻干 燥 机 ( 北京亚星仪科科技发展有限公 司) ; master-sizer 型粒度分析仪 ( 英国马尔文仪器 有限公司) ; md200-2 型氮气吹扫仪 ( 杭州奥威仪器有限公司) ; 。 去氢骆驼蓬碱对照品 ( 批号 ，南京 泽朗医药科技有限公司，含有量＞ 98%) 。聚乳酸 ( 分子量 15 000，批号 2016081715，山东岱罡科技 有限公司) ; poloxamer 188 ( 德国巴斯夫公司，含 有量 ＞ 98%) 。甲 醇 为 色 谱 纯; 其他试剂均为分 析纯。 sd 大鼠，雌雄兼具，体 质 量 ( 300 ± 20) g， 购自上海斯莱克实验动物有限公司，许 可 证 号 scxk ( 沪) 2012-0002。
2 方法与结果
2. 1 去氢骆驼蓬碱含有量测定
2. 1. 1 色谱条件
waters c18 色谱柱 ( 250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ; 流动相甲醇-0. 2% 甲酸 ( 55 ∶ 45) ; 检测波长 248 nm; 体积流量 1. 0 ml /min; 柱 温 35 ℃ ; 进样量 20 μl。
2. 1. 2 线性关系考察
精密称取去氢骆驼蓬碱对 照品 10. 0 mg，置于 10 ml 量瓶中，加入适量甲醇 超声溶解，室温下放置 40 min 后甲醇定容，精密 量取 适 量，甲 醇 稀 释 成 20. 0、10. 0、5. 0、0. 5、 0. 05 μg /ml，在 “2. 1. 1” 项色谱条件下进样测 定。以峰面积 ( y) 对溶液质量浓度 ( x) 进行回 归，得方程为 y = 1. 212 4x+0. 009 3 ( r = 0. 999 9) ， 在 0. 05～20. 0 μg /ml 范围内呈良好的线性关系。
2. 1. 3 方法学考察
取 0. 05、5. 0、20. 0 μg /ml 对照品溶液，在 “2. 1. 1”项色谱条件下进样测定 5 次，测得 3 种质量浓度下日内精密度 ｒsd 分别为 0. 43%、0. 19%、0. 17%，日间精密度 ( 连续测定 5 d，每 天 1 次) ｒsd 分 别 为 0. 82%、0. 37%、 0. 15%。取空白纳米粒混悬液或 1. 0%十二烷基硫酸钠水溶液 1 ml，加入 0. 5、5. 0、20. 0 μg /ml 对 照品溶液各 1 ml，测得去氢骆驼蓬碱平均加样回 收率为 99. 71%，ｒsd 小于 1. 76%。
2. 2 聚乳酸纳米粒制备
精密称取去氢骆驼蓬碱 20 mg、聚乳酸 160 mg，溶于 25 ml 丙酮-乙醇等比 例混合溶液中，注射器缓慢加到 50 ml 含 0. 25% poloxamer 188 的水相中，超声 10 min，减压旋蒸除 去有机溶剂，浓缩，离心 60 min ( 25 000 r/min) ， 沉淀物用蒸馏水洗涤后定容至 10 ml，以 5%甘露 醇为冻干保护剂，－70 ℃下预冻 48 h，挂入冷冻干 燥机中制备，即得，以去氢骆驼蓬碱计，含有量为 2. 88%。同法制备空白聚乳酸纳米粒。
2. 3 粒径、pdi、zeta 电位测定
取聚乳酸纳米 粒冻干前混悬液，蒸馏水适当稀释后放入比色池 中，测定粒径、pdi、zeta 电位。 聚乳酸纳米粒粒径分布在 100 ～ 450 nm 之间，平均 粒 径 为 ( 195. 38 ± 2. 02 ) nm，pdi 为 ( 0. 131 ± 0. 034) ，zeta 电位为 ( －19. 48±0. 36) mv。
3 讨论
本实验制备的去氢骆驼蓬碱聚乳酸纳米粒粒径 较小，分布均匀，可能是由于溶解药物、载体的丙酮和乙醇可在水相中迅速扩散，易得到较小的粒径; 水相中表面活性剂对纳米粒具有稳定作 用，不易发生粘连，平均粒径为 ( 195. 38± 2. 02) nm，而冻干后虽增加至 ( 203. 28 ± 3. 94) nm，但 粒径变化无显著差异 ( p＞0. 05) 。另外，混合溶剂 乙醇与丙酮的比例不可过高，以防聚乳酸析出; 水 相中表面活性剂浓度也不宜太高，防止增溶作用使 去氢骆驼蓬碱溶于水相，从而降低包封率、载药 量，经前期预实验考察，最终选择 0. 25%。
免责声明：文章仅供学习和交流，如涉及作品版权问题需要我方删除，请联系我们，我们会在时间进行处理。