本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡α干扰素(ifn-α)水平。用纯化的鸡α干扰素(ifn-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(ifn-α),再与hrp标记的α干扰素(ifn-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物tmb显色。tmb在hrp酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的α干扰素(ifn-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(od值),通过标准曲线计算样品中鸡α干扰素(ifn-α)浓度。
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鸡α干扰素(ifn-α)计算
以标准物的浓度为横坐标,od值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的od值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与od值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的od值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
