①atcc细胞没有生长到足以覆盖瓶底壁的大部分表面之前，不要急于传代。
②原代培养时细胞多为混杂生长，上皮样细胞和成纤维样细胞并存的情况很常见。传代时不同的细胞有不同的消化时间，因此要根据需要，注意观察及时进行处理，并可根据不同细胞对胰蛋白酶的耐受时间不同而分离和纯化所需要的细胞。另外早期传代的培养细胞较已经建系的培养消化时间相对较长。吹打细胞时动作要轻巧，尽可能减少对细胞的损伤。
③传代时细胞接种数量要多一些，使atcc细胞能尽快适应新环境有利于细胞生存和增殖。随消化分离而脱落的组织块也可一并传人新的培养瓶。