除非特殊说明，在所有情况下，所用溶剂的体积应该是色谱柱体积的40~60倍。应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效和容量因子等色谱参数，比较液相色谱仪色谱柱性能的改善，以确定清洗的效果。确保色谱柱中没有样品盒缓冲溶液，清洗前所用的溶剂应与zui初清洗时所用的溶剂相溶。应确保实验测试时所用的流动相与色谱柱中zui后的溶剂相溶。
zui常见色谱柱再生用溶剂及其顺序见下表：
填料类型
再生用溶剂及其顺序
正相填料
用四氢呋喃冲洗；用甲醇冲洗；用四氢呋喃冲洗；二氯甲烷冲洗；用无本正己烷冲洗
反相填料
用hplv级水冲洗，冲洗时进4等份的200µl二甲亚砜；用甲醇冲洗；用氯仿冲洗；用甲醇冲洗；
阴离子交换填料
用hplc级水冲洗；用甲醇冲洗；用氯仿冲洗
阳离子交换填料
用hplc级水冲洗；在冲洗的过程中进4等份的200µl的dmso；四氢呋喃清洗
蛋白质凝胶过滤填料
去除蛋白质尺寸排阻介质中的污染有两种清洗/再生的方法：1弱保留蛋白质，用30mol/l ph3.0磷酸盐缓冲液冲洗；2强保留蛋白质，用99%的水到99%的乙腈梯度洗脱60min
关键词：色谱柱 液相色谱仪