注意事项
1、电泳中使用的溴化乙锭（eb）为中度毒性、强致癌性物质，务必小心，勿沾染于衣物、
皮肤、眼睛、口鼻等。所有操作均只能在专门电泳区域操作，戴一次性手套，并及时更换。
2、预先加入eb 时可能使 dna 的运动速度下降15%左右，且不同构型的 dna 的影响程度不同。所以为取得较真实的电泳结果可以在电泳结束后再用 0.5μg/ml 的 eb 溶液浸泡染色。eb在光照下易降解，若凝胶放置一段时间后才观察，即使原来胶内或样品已加 eb，建议选择eb溶液浸泡染色。
3、加样进胶时不要形成气泡，需在凝胶液未凝固之前及时**，否则，需重新制胶。
4、电泳时溴酚兰在琼脂糖凝胶中的运动速度可以用于参考电泳速度，已实际电泳条带运动速度为准。
常见问题分析
常见问题
原因
对策
dna条带模糊
dna降解
实验过程避免核酸酶污染
电泳缓冲液陈旧
电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，ph值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。tbe建议使用10次就更换缓冲液
所用电泳条件不合适
电泳时电压不应超过6v/cm，温度＜30℃，巨大dna链电泳，温度应＜15℃，核查所用电泳缓冲液的缓冲能力，注意经常更换
dna上样量过多
减少凝胶中dna上样量
dna含盐过高
电泳前通过乙醇沉淀去除多余盐分
有蛋白污染
电泳前酚抽提去除蛋白
dna变性
电泳前勿加热，用te缓冲液稀释dna
出现片状拖带或涂抹带
pcr扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往pcr体系需要优化，pcr程序需要摸索。
其对策有：调整pcr体系和pcr程序，摸索出合适的条件。
不规则dna带迁移
电泳条件不合适
电泳时电压不应超过6v/cm，温度＜30℃，巨大dna链电泳，温度应＜15℃，核查所用电泳缓冲液的缓冲能力，注意经常更换
dna变性
电泳前勿加热，用te缓冲液稀释dna
带弱或无dna带
dna上样量不够
增加dna上样量，聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度高，上样量可适当降低
dna降解
实验过程避免核酸酶污染
dna跑出凝胶
缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度
eb染色的dna，所用光源不合适
应用短波长（254nm）的紫外光源
dna带缺失
dna跑出凝胶
缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度
分子大小相近的dna带不易分辨
增加电泳时间，核准正确凝胶浓度
dna变性
电泳前勿加热，用20mm nacl 缓冲液稀释dna
dna链巨大，常规凝胶电泳不合适
在脉冲凝胶电泳上分析
电泳时ladder扭曲
配胶的缓冲液和电泳缓冲液不是同时配置
同时配置，电泳缓冲液高出液面1-2mm即可
电泳时电压过高
电泳时电压不应超过6v/cm