1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3.样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
abc2乳腺癌增强蛋白2抗体
alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗体
alpha b crystallinα晶状体球蛋白b/αb-crystallin抗体
adora2b腺苷a2b受体/神经生长因子1受体抗体
ark5ampk的相关蛋白激酶5抗体
anp32c致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体
adenosine deaminase腺苷脱氨酶抗体
asb4含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体
atrnl1atrnl1蛋白抗体
afp4aafp4a蛋白抗体
apbb2铁蛋白fe65样蛋白1抗体
apbb3铁蛋白fe65样蛋白2抗体
appbp2β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体
aph-1b早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白aph1抗体
phospho-akt1 (tyr474)磷酸化蛋白激酶akt1抗体
phospho-akt1 (ser473 + tyr474)磷酸化蛋白激酶akt1抗体
ash1lash1l蛋白抗体
adra2cα2c-ar肾上腺素能受体抗体
azi1中心体蛋白azi1抗体
alpk3α蛋白激酶3抗体（心肌）
关键词：水浴锅 恒温箱 洗板机