反相高效液相色谱柱的物理性质:
硅胶纯度:硅胶纯度对强极性化合物的分离较为重要,残留金属离子浓度、硅胶的杂质会影响化合物的峰形,硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形,易发生拖尾。
a型硅胶是由金属硅酸盐制备而来,具有很高的金属含量,硅胶纯度较低,可用作中性化合物和非离子化合物的分离。
b型硅胶是以无金属的工艺制备而来,纯度高、酸性较弱、只含有微量的金属,可用于分离离子化合物、可电离化合物,特别是碱性化合物。
现在的色谱柱填料以b型硅胶为主,但是不同品牌、不同类型的色谱柱的硅胶表面金属含量还是略有差别的,如果色谱峰形较差,需要关注不同品牌色谱柱的硅胶纯度。
色谱柱尺寸:增加色谱柱长度,可以在一定程度上提高柱效,但也会升高压力和导致峰展宽;宽柱径,提高载样量,但也会增加横向扩散,同样会导致峰展宽。窄柱径可以节约溶剂,可减少横向扩散,但压力较大,对系统要求较高。