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色原底物ESPMT测定肌酐(SOX法)

2024/4/28 22:13:23发布8次查看
色原底物espmt化学名称为n-乙基-n-磺丙基-3-甲苯胺钠盐,也简称tops,属于新型trinder’试剂中的一种,广泛应用于葡萄糖、甘油三酯、*等生化指标的检测。比如espmt用于肌酐的肌氨酸氧化酶(sox)法测定。
血清和尿中都含有肌酐,它是肾功能常用的常用指标,也是健康体检的必检项目。肌酐(creatinine,cre),化学式是c4h7n3o,是肌肉在人体内代谢的产物,主要由肾小球滤过排出体外。每20克肌肉代谢克产生1mg肌酐。
色原底物espmt测定肌酐
espmt测定肌酐原理:
肌酐在肌酐酶(肌酐亚氨基水解酶)的催化下水解成肌酸,肌酸在肌酸酶crh(肌酸脒基水解酶)催化下水解成肌氨酸和尿素,然后用肌氨酸氧化酶sox将肌氨酸氧化成*、甲醛以及过氧化氢。生成的过氧化氢即可以用espmt与4-aap在过氧化物酶存在下进行测定,生成的显色产物含量与肌酐浓度成正比,与光度计测得的吸光度成正比。
试剂准备:
试剂1,由肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化氢酶、espmt组成;试剂2,由肌酐胺基水解酶、过氧化物酶、4-氨基*(4-app)组成;校准品:肌酐溶液。
试剂要求:
试剂溶液应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物。
液体试剂的净含量应不少于标示值。
试剂以去离子水为空白对照,在37摄氏度546nm波长条件下,吸光度应小于0.2a。
当样本浓度为60umol/l时,吸光度变化应不小于0.016a。
试剂检测范围应在10-7000umol/l,线性相关系数r应不小于0.9900,当样本浓度不大于390μmol/l时,线性绝偏差应不大于±39.0μmol/l;当样本浓度大于390μmol/l时,线性相对偏差应不大于±10.0%。变异系数小于0.03,相对偏差小于0.05。
以色原底物espmt测定肌酐是比较常用的方法,由于过程中会生产肌氨酸和尿素,也可以通过尿素检测的方法来测量,灵敏度不如sox法。德晟可提供肌酐检测所需的色原espmt、酶制剂crh、sox、缓冲剂等等。
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