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什么是蛋白质印迹?

2024/4/28 22:05:23发布21次查看
蛋白质印迹是研究蛋白质结构和功能的常用技术。通常,蛋白质样品在 sds 凝胶上进行电泳,然后转移到固相支持物(硝基纤维素或 pvdf 膜)上,以便随后用特异性抗体进行探测。与 rna/dna 印迹技术的进步不同,剥离抗原/抗体并重复使用印迹是很困难的。
印迹的回收具有许多优点:有效利用数量有限的样品。
比较在同一印迹中使用不同抗体获得的图像。
使用相同或不同的抗体确认结果。
重复使用印迹更加经济且耗时更少。
重复使用蛋白质印迹的想法源于这样的事实:抗原-抗体复合物(例如,免疫亲和柱)可以被破坏并且免疫亲和柱可以多次重复使用。然而,免疫亲和技术中常用的洗脱条件(低或高 ph、使用离液剂)并不能有效地从蛋白质印迹中剥离抗体。
adi 现在开发了专门配制的解决方案,可以在温和的条件下有效且几乎定量地剥离抗体。它具有以下优点:新型抗体条解决方案的优点
1. 室温剥离抗体(无需加热)。
2.无刺激性气味,巯基乙醇。
3. strip 溶液为 10x 溶液,可立即使用。只需将印迹浸泡在溶液中 10-15 分钟即可。
4. 在封闭缓冲液(试剂盒中提供)中短暂孵育后,印迹可在 15-60 分钟内重复使用。
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