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大肠杆菌O157选择性显色培养基(国标)

2024/4/28 19:42:03发布5次查看
货号
名称
规格
存储
mv1575a
hicrome™ec o157:h7 selective agar base,modified(需添加剂fd187)
100g,500g
2-8℃密闭
fd187
hicrome ec o157:h7 selective supplement
5vl
2-8℃
原理
肠出血性大肠杆菌又名为产vero细胞毒素的大肠杆菌(vtec/ehec)。尽管有许多血清型大肠杆菌产vero细胞毒素(3),但大肠杆菌o157:h7是导致人类感染的常见的一种。它有几种不常见的生化特性可用于鉴定。它属于仅少数的beta葡萄糖醛酸酶(-),24小时内不发酵*或鼠李糖。它们可从接种到含*而非乳糖的培养基的粪便标本中分离出来。
该款显色培养基采用植物源蛋白胨,以取代动物源,避免了bse/tse风险。它基于 rappaport 和henigh(1)描述的配方而成。培养基含*和显色混合剂,不含乳糖和指示剂染料。显色剂被大肠杆菌o157:h7 特异性裂解,产生深紫至洋红色。普通大肠杆菌形成蓝绿色菌落。
培养基中的hiveg的水解物和酵母粉提供碳源、氮源营养和长链氨基酸、维生素和其他生长营养。氯化钠维持渗透压平衡。添加剂使培养基更具有选择性(2)。添加剂中的亚碲酸钾选择性抑制气单胞菌和普罗威登菌。添加剂中的新生霉素抑制革兰阳性菌。月桂基硫酸钠抑制伴随的革兰阳性菌群。
培养基成分
组成 g/l
hiveg的水解物 5.000
酵母粉 3.000
* 7.000
合成离子活性剂1号 1.500
月桂基硫酸钠 0.100
显色混合剂 0.250
琼脂 15.000
终ph(25°c) 6.8±0.2
配制
31.85g溶于990ml蒸馏水,加热至沸使*溶解。高压灭菌后,冷却至45-50℃,无菌加入复溶的添加剂(货号fd187,先用10ml蒸馏水复溶)。混匀并倾注平板。
质量控制
外观:奶油色至黄色均一自由粉末
成胶性: 牢固,与1.5%琼脂相当
制备好的培养基颜色和透明度:在平皿中为浅琥珀色,透明至轻微不透明凝胶
配比反应:25°c下3.18% w/v水溶液,ph值为6.8±0.2
ph值要求:6.60-7.00
培养反应:
加入添加剂(货号fd187)后,在35-37°c培养18-24小时,观察如下:
菌种
接种量(cfu)
生长状况
回收率
菌落颜色
大肠杆菌atcc 25922
50-100
生长很少
≤10%
蓝绿色
大肠杆菌o157:h7 nctc 12900
50-100
旺盛
≥50%
深紫-洋红色
肺炎克雷伯菌
atcc 13883
50-100
一般-好
30-40%
无色-淡紫色(黏液状)
铜绿假单胞菌
atcc 27853
50-100
一般-好
30-40%
无色
*
atcc 25923
≥103
抑制
0%
枯草芽孢杆菌
atcc 6633
≥103
抑制
0%
参考文献
1.rappaport f.and henigh e.,1952,j.clin.pathol.,5:361.
2.zadik p.m.,cahpman p.a.and siddons c. a.,1993,j.med.microbiol.,39,155-158.
3.smith and scottland,1988,j.med.microbiol.,26:77-85
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