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格特隐球菌PCR试剂盒使用方法

2024/4/28 0:26:02发布4次查看
格特隐球菌pcr试剂盒使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2ml,注入无菌edta2na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 pcr 阳性对照(以 10e2-10e7 拷贝/μl 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 dna 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μl 荧光 pcr 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μl 1×10e8 拷贝/μl 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μl 1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μl 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10e5 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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