从恶臭假单孢菌(pseudomonas sp．s-47)的dna中扩增得到924bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段，将其构建入pbluescriptsk载体bamhi和saci位点间。测序结果显示与kim(2000)报道一致。将该基因插入带庆大霉素抗性基因启动子和tlt2终止子载体pg251、分别带ompa和eap信号肽、lpp和gm′启动子载体pyf395和pyf5254中，构建组成型表达载体pg251，分泌型表达载体pyfx1，pyfx2。酶活测定结果显示pg251为665mu／ml，pyfx1，pyfx2分别为1815mu/ml，1015mu／ml。sds-page电泳显示表达蛋白产物的分子量约为35kd。分泌型表达载体pyfx1表达量大于pyfx2，组成型表达载体pgx1由于使用弱启动子表达量较低。完成机构：[1]上海市农业遗传育种重点实验室，上海201106 [2]上海市农业科学院农业生物技术研究中心，上海201106