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ELISA试剂盒实验标本该如何处理

2024/4/25 13:29:26发布4次查看
elisa试剂盒标本处理复杂多样,一不小心没处理好可能会导致实验的数据偏差。那到底怎么处理才算是比较合理的呢?通蔚试剂生物为您总结一份elisa试剂盒实验标本处理攻略,请收好啦!
一、血清的采集、处理和保存
1.真空采血针采集2ml 新鲜血液,加入无菌试管中。
2.采血后室温静置1小时。
3.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。
5.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种elisa试剂盒测定。大部分elisa试剂盒检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以hrp为标记的elisa试剂盒测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。此外还应避免细菌污染,因为菌体中可能含有含有内源性过氧化物酶,也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜时检测。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法elisa试剂盒中可使本底加深。
二、血浆的采集、处理和保存
1真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中。
2.按1:9加入抗凝剂(edta、草酸钠、肝素),30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集)。
3.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心5 min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。
5.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种elisa测定。请注意指标说明书上对于抗凝血剂是否有特殊要求,建议使用 edta。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。注意事项:制备血浆标本需借助于抗凝剂edta, 抗凝的标本因纤维蛋白原干扰而造成假阳性。
三、尿液的采集、处理和保存
1.采集尿液样本500ul加入无菌试管中。
2.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10 min,将离心好的样本留上清,弃下面沉淀。
3.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存 1 个月;-70℃下,可放置保存6个月。
四、细胞上清液的采集、处理和保存
1.采集细胞培养上清液500ul,加入无菌试管中。
2.将采集血液用离心机 4℃,2500rpm 离心 10 min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
3、取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。
五、各类组织匀浆的采集、处理和保存
1.采集组织,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,剔除附属的结缔组 织,称取组织块。
2.用移液管量取0.1m pbs或者用0.86%冷生理盐水,匀浆介质或生理盐水的体积总量应 该是组织块重量的9倍,用眼科小剪尽快剪碎组织块(天然时操作要在冰水浴中进行,将盛有组织的小烧杯放入冰水中)。
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