在使用过程中，紫外可见分光光度计由于慢散光、波长等因素的变化出现系统误差，影响分析结果的准确性。因此需要对分光光度计进行定期校正，减少误差，若所需准确度很高的测量，则必须天天校正。
需要校正的内容：
1.波长的准确度试验以仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间误差表示，应在±1.0nm范围内。可用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正；
2.吸收度的准确度试验；
3.杂散光的试验；
4.波长重现性试验；
5.分辨率试验。
校正方法：
1.吸光度的校正
校正吸光度常用一很纯物质一定浓度的溶液为标准，且此溶液的吸光度系数经不同实验室核对，常用硫酸铜、硫酸铵钴和硝酸钠或钾的溶液。
2.波长或波数的校正
可用具有窄吸收带的溶液，滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。如果要求很高的精密度时，可用放电灯泡发射的射线来校正。
3.杂散光的校正
杂散光的校正可用一个能*吸收某一波长单色光，且在其他波长吸收很弱的溶液。从这个溶液所表现的透光情况可推测杂散光的近似值。