1. 培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。
2. 细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留 10ml 培养液培养观察，细胞生长至汇合度 80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。
实验操作各环节小窍门
1、包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别。还有有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，具体方法简要的列出如下:①亲和素生物素:先亲和素先包被载体，加入生物素化的dna，这种包被方法均匀、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②脂类物质:可将其在有机溶剂（例如乙醇）中溶解后加入elisa板孔中，开盖置冰箱或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质自然干固在固相表面。③小分子必须依靠和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。
2、包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理：由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。常用的包被液除了刚才提到的ph9.6碳酸盐缓冲液，还有ph7.2的磷酸盐缓冲液和ph7-8的tris-hcl缓冲液等等。
3、封闭：继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙，从而排斥elisa后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有：0.05%-0.5%的bsa；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。
4、洗涤板：可以说在elisa操作中，洗涤是主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的，清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性地吸附的干扰物质，在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差，人为因素很大（当然有条件的用洗板机除外），洗的不*或串了孔，对如此灵敏的elisa系统可是不小的影响。
5、加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用pbs稀释，也可用封闭液去稀释。如需加二抗，还要注意二抗的工作浓度，太高浪费，太低则着色浅。
6、显色:显色系统又很多，我们一开始做的时候，要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存hrp结合物加硫柳泵，ap结合物可加叠氮钠。
7、每次做尽量要把阴阳空三个对照做好，如出现问题也好分析。
il-11elisa试剂盒小鼠mdm2小鼠p53结合蛋白同源物(mdm2)elisa试剂盒 ，英文名： mdm2 elisa kit
小鼠m2-型丙酮酸激酶(pkm2)elisa试剂盒 ，英文名： pkm2 elisa kit
小鼠l-型电压依赖性钙离子通道α1d亚基(cacnα1d)elisa试剂盒 ，英文名： cacnα1d elisa kit
小鼠l-型电压依赖钙离子通道α1s亚基(cacnα1s)elisa试剂盒 ，英文名： cacnα1s elisa kit
小鼠l-型电压依赖钙离子通道α1f亚基(cacnα1f)elisa试剂盒 ，英文名： cacnα1f elisa kit
小鼠l-型电压依赖钙离子通道α1c亚基(cacnα1c)elisa试剂盒 ，英文名： cacnα1c elisa kit
小鼠lin-28同源物a(lin28a)elisa试剂盒 ，英文名： lin28a elisa kit
小鼠l1-细胞粘附分子(l1cam)elisa试剂盒 ，英文名： l1cam elisa kit
小鼠kruppel样因子1(klf1)elisa试剂盒 ，英文名： klf1 elisa kit
小鼠klotho蛋白(kl)elisa试剂盒 ，英文名： kl elisa kit
小鼠klothoβ蛋白(klβ)elisa试剂盒 ，英文名： klβ elisa kit
小鼠ki-67蛋白(ki67p)elisa试剂盒 ，英文名： ki67p elisa kit
小鼠jun小鼠b原癌基因(junb)elisa试剂盒 ，英文名： junb elisa kit
小鼠jagged小鼠1蛋白(jag1)elisa试剂盒 ，英文名： jag1 elisa kit
小鼠il2诱导t细胞激酶(itk)elisa试剂盒 ，英文名： itk elisa kit
小鼠ige-fc片段受体ⅱ(fcεrⅱ)elisa试剂盒 ，英文名： fcεrⅱ elisa kit
小鼠g蛋白偶联受体120(gpr120)elisa试剂盒 ，英文名： gpr120 elisa kit
小鼠g蛋白偶联雌激素受体1(gper)elisa试剂盒 ，英文名： gper elisa kit
小鼠g蛋白β1(gnβ1)elisa试剂盒 ，英文名： gnβ1 elisa kit
小鼠gremlin小鼠1蛋白(grem1)elisa试剂盒 ，英文名： grem1 elisa kit
小鼠gata结合蛋白2(gata2)elisa试剂盒 ，英文名： gata2 elisa kit
小鼠f-框亮氨酸丰富重复蛋白3(fbxl3)elisa试剂盒 ，英文名： fbxl3 elisa kit
小鼠fk506结合蛋白样蛋白(fkbpl)elisa试剂盒 ，英文名： fkbpl elisa kit
小鼠e选择素(sele)elisa试剂盒 ，英文名： sele elisa kit
小鼠endoglin蛋白(eng)elisa试剂盒 ，英文名： eng elisa kit
小鼠egl小鼠nine同源物1(egln1)elisa试剂盒 ，英文名： egln1 elisa kit
小鼠egf样域蛋白7(egfl7)elisa试剂盒 ，英文名： egfl7 elisa kit
小鼠eb病毒诱导蛋白3(ebi3)elisa试剂盒 ，英文名： ebi3 elisa kit
小鼠e1a结合蛋白p300(ep300)elisa试剂盒 ，英文名： ep300 elisa kit
小鼠e1a激活基因阻遏子1(creg1)elisa试剂盒 ，英文名： creg1 elisa kit
小鼠d-二聚体(d2d)elisa试剂盒 ，英文名： d2d elisa kit
小鼠d-多巴色素变位酶(ddt)elisa试剂盒 ，英文名： ddt elisa kit
小鼠dna修复蛋白rad50(rad50)elisa试剂盒 ，英文名： rad50 elisa kit
小鼠dna损伤诱导转录因子3(ddit3)elisa试剂盒 ，英文名： ddit3 elisa kit
小鼠dna酶ⅰ样蛋白3(dnase1l3)elisa试剂盒 ，英文名： dnase1l3 elisa kit
小鼠dna甲基转移酶3b(dnmt3b)elisa试剂盒 ，英文名： dnmt3b elisa kitil-11elisa试剂盒