您好,欢迎来到三六零分类信息网!老站,搜索引擎当天收录,欢迎发信息
免费发信息

ELISA试剂盒各项实验条件的选择是很重要

2024/4/18 22:15:39发布3次查看
elisa试剂盒试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的试验确诊办法。因为其试剂安稳、易保存,操作简便,结果判断较客观等要素,已广泛应用在免疫学查验的各领域中,进行各项试验条件的挑选是很重要的,其间包含:
(1) 固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不论何种载体,在运用前均可进行挑选:用等量抗原包被,在同一试验条件下进行反响,调查其显色反响是否均一性,据此判明其吸附功能是否杰出。
(2) elisa试剂盒包被抗体(或抗原)的挑选:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求ph在9.0~9.6之间。吸附温度,时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的*适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,调查阳性标本的od值。挑选od值而蛋白量*少的浓度。对于大都蛋白质来说一般为1~10μg/ml。
(3) 酶符号抗体作业浓度的挑选:首先用直接elisa法进行开始效价的滴定(见酶符号抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参阅品及酶符号抗体分别为不同的稀释度)在正式试验系统里准确地滴定其作业浓度。
(4) elisa试剂盒酶的底物及供氢体的挑选:对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反响,而自身无色。有些供氢体(如opd等)有潜在的致癌效果,应注意防护。elisa试剂盒有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体,如tmb和abts是现在较为满足的供氢体。底物效果一段时刻后,应参加强酸或强碱以停止反响。一般底物效果时刻,以10-30分钟为宜。底物运用液有必要新鲜制造,尤其是h2o2在临用前参加。
该用户其它信息

VIP推荐

免费发布信息,免费发布B2B信息网站平台 - 三六零分类信息网 沪ICP备09012988号-2
企业名录