四环素类药物属广谱抗生素,但在发挥药效的同时对人体有较大的毒副作用,因此,对四环素类抗生素的检测具有非常重要的意义。目前四环素类抗生素的含量测定方法有微生物法、紫外法、tlc法、液相色谱法及毛细管区带电泳法等。相关研究人员在文献工作的基础上,建立了以甲醇-乙腈-0.01mol/l草酸为流动相、梯度洗脱的反相液相色谱方法,并应用于实际样品的分析,取得了满意的结果。
反相高效液相色谱方法进行检测所需仪器
液相色谱仪,紫外-可见检测器;精密ph计;电子天平;玻璃过滤器;ad/da卡和pc兼容机。
检测时的仪器色谱条件
色谱柱: (250mm×4.6mm.i.d,5µm);流动相:甲醇-乙腈-0.01mol/l草酸(ph2.0)在1min内由8:24:68(v/v/v)变为10.5:31.5:58,恒定3min,在4~10min内变为15:45:40;流速:1.0ml/min;进样量:20µl;柱温:25℃;检测波长:270nm。
以标准加入法进行测定, 在10min内分离检测四环素等7种化合物。实验结果表明该方法定量准确,重现性好。
关键词：液相色谱仪 电子天平 色谱柱