elisa试剂盒均有成功分离羊水来源干细胞的报导,大多是利用羊水细胞贴壁的特点通过多次传代的方法获得干细胞。tsai ms 等采用两步培养法从孕中期羊水中成功分离出具有mscs 特征的干细胞。随后de coppi 等通过免疫磁珠方法分离出c - kit ( cd117) 阳性细胞,这些细胞在体外增殖迅速,可以形成稳定的细胞系,他将这些细胞命名为羊水干细胞。此外通过克隆化培养的方法也可以从羊水中获得干细胞。从现有研究情况看来,目前尚未形成统一的羊水干细胞培养体系。
elisa试剂盒采用贴壁法分离获得羊水细胞,培养细胞使用低糖dmem 培养基。收集的20 例羊水标本中有17 例原代培养成功,并获得可以持续传代的稳定细胞系。培养的羊水细胞体外增长迅速,倍增时间约36h。流式细胞仪检测显示细胞表达cd29、cd44、cd105 等间充质干细胞表面标志,不表达造血干细胞表面标志cd45 和cd133。rt - pcr 的结果表明分离获得的干细胞表达oct - 4 和nanog 基因,且不同代的细胞间均有表达。oct - 4 和nanog 被认为是干细胞多能分化的主要调节因子,干细胞分化后其表达立即下调。以上结果与文献报道一致,表明羊水细胞经体外培养扩增可以得到具有mscs 性质的干细胞。
