这是将色谱柱的入口端打开后的样子，也就是色谱柱中先接触到样品的填料。
正常的色谱柱入口端填料绝大多数应该是白白的、平整的，而这些是受到严重污染的色谱柱——变色、堵塞、杂质蓄积......
omg！
柱子造的都没“柱”样了！
那怎么办？
如何避免色谱柱过早地“夭折”呢？
办法还是有滴~~
通常，在分析柱前面，安装一支保护柱就能大大减少损失。
那么，今天我们一起来学习一下，保护柱的重要性吧。
1、 为什么要使用保护柱？
2、 哪些样品需要使用保护柱？
3、 保护柱会不会影响分离效果？
4、 如何选择保护柱？
5、保护柱的使用及注意事项有哪些？
01
为什么使用保护柱呢？
样品上机检测前，一般会经前处理去除杂质，但是不能*避免，来自于样品及色谱系统的微小的固体颗粒物、色素杂质、未沉淀的蛋白等，可能会滞留在色谱柱中，从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。
保护柱是安装在分析柱之前的小柱，能起到分离净化的作用，大大降低分析柱受污染的程度，延长分析柱使用寿命，因此为您节省很多的耗材费用。
02
哪些样品需要使用保护柱？
常规的液相色谱检测中均需要使用保护柱，特别是对于食品、中药、天然产物、合成中间体、复杂制剂及血浆等生物样品的检测，因待测基质的复杂性，可能会导致色谱系统压力升高、色谱柱堵塞、填料变色、测试结果不准确等各种影响。
03
保护柱会不会影响分离效果？
通常来讲，理想的保护柱填料与分析柱填料一致，具有相同的选择性，被测物基本上全被洗脱出来，不会影响待测物的响应值。
保护柱柱长选择恰当的话，不会产生峰扩散，也基本不会引起分离度的降低。
图1 是安装卡套式保护柱后的对比色谱图，保留时间略微有延迟（原因是安装了保护柱，色谱柱相当于长了一点点）。总体来讲，卡套式保护柱对分析结果基本无影响。
图1
【液相条件】
色谱柱：capcell pak c18 mgiii-h s3; 2.0 mm i.d. x 100 mm
保护柱：capcell pak c18 mgiii-h s3; 2.1 mm i.d. x 5 mm
流动相：60%乙腈
流 速：0.5 ml/min
温 度：40℃
检 测：uv 254 nm
样 品：萘（峰4）
04
如何选择保护柱？
1、保护柱与分析柱应具有相同填料、相同粒径、相同内径，以确保选择性一致（同一个品牌）。
2、一般长度为10mm的保护柱可以起到充分的保护作用，过长的话可能会引起待测物的谱带扩张。
3、尽量选择可更换柱芯的的保护柱，柱芯价格相对便宜，易于使用和维护，而且死体积小。
4、如果是用于uhplc柱，还要考虑一下保护柱的耐压能力。
05
保护柱的使用及注意事项有哪些？
安装
1、卡套式保护柱一般标注液流方向，请按照色谱柱标签所示方向进行安装，尽量不要双向混用。
2、卡套式保护柱可以更换柱芯，对于capcell pak 系列保护柱，即使柱芯内径不同，只要柱芯的长度相同，柱套既可通用。
3、保护柱与卡套组装好后，请直接连接在色谱柱入口端。一般用手拧紧卡套即可，如有漏液发生，可再使用扳手拧紧30°，用力太过有可能导致压环变形。
使用注意事项
1、专柱，避免保护柱成为不同项目的交叉污染源。
2、当色谱峰的理论塔板数下降，柱压上升，或是关键分离度下降时，都应该及时更换保护柱。
3、不慎发生强污染时，可以将分析柱卸下，单独冲洗保护柱，可以使污染物更快的从保护柱中流出。
4、保护柱或柱芯一般不建议超声清洗，因可能对填料表面修饰有影响，当柱效下降时直接更换柱芯。
后，再给大家介绍2款靠谱的保护柱吧，一款是应用于hplc的保护柱，另一款是应用于uhplc的保护柱。
tips 知识扩展
1capcell pak 卡套式保护柱 （应用于hplc）
产品特点
1、应用于高效液相色谱，capcell pak 系列分析柱均有配套的保护柱。
2、capcell pak 保护柱，即使柱芯内径不同，只要柱芯的长度相同既可通用。
3、只对单价较低的柱芯进行更换即可实现对分析柱的保护。
.2capcell exp 卡套式保护柱 （应用于uhplc）
产品特点
1、高耐压 100 mpa，可用于超高效液相色谱。
2、几乎无扩散，对分离的影响降低到极低限度。
3、可直接连接到色谱柱上，不会产生死体积的影响。
4、不需要工具，用手拧紧即可简便连接。