免疫球蛋白g4elisa试剂盒含以下组件:涂层板、标准品、可溶解物、酶标记抗体、缓冲液、底物和终止液。操作步骤如下:
准备试板:取出所需数量的涂层板,将其加入微孔板支架中。每个微孔加入100μl的稀释液,并在37℃孵育30分钟。取出稀释液后,在板孔中加入100μl的标准样本或生物样本,然后再次在37℃孵育2小时。
洗涤板孔:取出支架,倒掉样本,加入清洁液并在每个孔内洗涤3次。将板子翻转,轻轻拍干。
加入酶标记抗体:将100μl的酶标记抗体加入每个孔中,并在37℃孵育1小时。
洗涤板孔:取出支架,倒掉样本,加入清洁液并在每个孔内洗涤3次。将板子翻转,轻轻拍干。
加入底物:向每个孔中加入100μl的底物,然后在暗处孵育30分钟。
加入终止液:向每个孔中加入50μl的终止液以停止反应。使用elisa分析仪器测量各个孔内的光密度值。
通过上述步骤,可以测量igg4的水平。试剂盒中的标准样品可以用来制作标准曲线,比较不同孔中的光密度值,以确定每个样本中igg4的浓度。
