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Ec UDG酶说明书

2024/4/7 17:55:59发布9次查看
产品描述
udg 酶可催化水解含有尿嘧啶的 dna 链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的 n-糖苷键,释放游离尿嘧啶。本尿嘧啶 dna 糖基酶(udg)来源于大肠杆菌 ung 基因,经重组表达与多步蛋白纯化而得。该酶分子量为 25kda,催化含尿嘧啶的单链和双链 dna 释放游离尿嘧啶,对 rna 无活性。
udg 酶常用于止 防止 pcr 扩增产物的交叉污染,其作用原理基于:在 pcr 反应中以 dutp 替代dttp 掺入 dna 中,形成了含 du 碱基的 pcr 扩增产物,udg 能选择性断裂单链和双链 dna中 u 碱基的糖苷键,降解 pcr 扩增产物,消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。由于大肠杆菌 udg 经高温失活,降温到低温后,活性会部分恢复;因此不建议本酶用于 防止 pcr 扩增产物的交叉污染。建议利用本公司的热敏 udg(目录号 ae0402)进行 防止 pcr 扩增产物的交叉污染。
产品应用
主要应用于 pcr 扩增产物的防污染。它的作用原理基于:在 pcr 反应中以 dutp 替代 dttp掺入 dna 中,形成了含 du 碱基的 pcr 扩增产物,udg 能选择性断裂单链和双链 dna 中 u碱基的糖苷键,降解 pcr 扩增产物,消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。
活性定义
37℃反应条件下,每分钟催化 60 pmole 尿嘧啶碱基从含尿嘧啶的双链 dna 上释放所需要的酶量为 1 u。
质量控制
无内切酶活性:50 u 的本酶和 1 μg 的 pbr322 dna 在 37℃下反应 2 小时,dna 的电泳谱带不发生变化。
运输与保存
干冰运输。-20℃保存,有效期2年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作!
本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
备注
长期储存 ( 非频繁使用; 每月 1-2 次 ): -70℃;每天或每周使用: -20℃。尽量避免多次冻融,切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。
udg 可以在 pcr 反应前清除不慎污染的 u-dna 分子,对于某个 pcr 扩增反应,整个实验室必须在所有的 pcr 反应中添加 dutp,使所有扩增产物都成为 u-dna。如仅某次 pcr 扩增反应使用 dutp,t -dna 仍积累,这个抗污染系统也难以起到wan全的作用。
udg/dutp 系统是 pcr 试剂专用的一种防污染措施,为了防止 pcr 产物的污染,尤其是在临检实验室中反复扩增同一片段时,必须严格规范实验室的区域划分和操作。
如果经过换房间、紫外照射、dnase 消化等措施后,依然对某个片段存在污染,建议在不同的扩增区重新设计引物,以错开污染片段。
大肠杆菌 udg 酶的反应温度可以在 37℃-50℃ 的范围内变化,建议在 37 度反应,也可根据实验需要在 37-50 ℃范围内自由调整反应温度。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
货号 品名 规格 品牌
78dc10122-200u ec udg酶 200u biohub
78dc10122-1000u ec udg酶 1000u biohub
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