wb实验的基本核心理念是抗原抗体的特异性反应，通过变性胶 sds-page 将不同分子量的蛋白质分离开，然后转移到固相载体 pvdf 膜上，再用脱脂牛奶作为封闭液进行封闭和一抗稀释液进行稀释。待目的蛋白和抗体充分结合后，用 tbst 洗脱液洗脱掉多余未结合的一抗，加入带有 hrp 标记的对应二抗，这样，我们的蛋白+一抗+二抗形成一个复合物，加以化学发光液，有靶蛋白的位置就会产生荧光，利用胶片或者化学发光仪就可以显现靶蛋白的条带显现。
wb常规实验流程：
蛋白提取→蛋白定量→制胶→电泳→转膜→封闭→一抗孵育→一抗洗脱→二抗孵育→二抗洗脱→化学发光→数据分析。