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假单胞菌的氯儿茶酚1,2-双加氧酶基因的克隆和表达

2024/4/4 8:17:32发布24次查看
从土壤中分离得到1株降解2,4-二氯酚(2,4-dcp)能力较强的细菌菌株gt24l-1,克隆了该菌株的3,5-二氯儿茶酚1,2-双加氧酶基因(dcpb),采用的克隆策略为:用southem杂交对dcpb进行定位后,构建重组质粒,再用斑点杂交从重组质粒中筛选目的转化子.经序列测定得知dcpb亚克隆片段全长4303bp,其中dcpb基因编码区765bp.核苷酸和推测的氨基酸序列分析表明,dcpb与已在genbank登记的相关基因有一定的差异.dcpb基因能够在大肠杆菌转化子中成功地表达有生物活性的酶.完成机构:[1]南京师范大学化学与环境科学学院,江苏南京210097 [2]浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江杭州310029 [3]华中农业大学生命科学技术学院,湖北武汉430070 [4]浙江大学环境与资源学院,浙江杭州310029
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