大量、频繁地使用抗生素，可使动物机体中的耐药致病菌很容易感染人类；而且抗生素药物残留可使人体中细菌产生耐药性，扰乱人体微生态而产生各种毒副作用。目前，在畜产品中容易造成残留量超标的抗生素主要有氯霉素、四环素、土霉素、金霉素等。其中，四环素与土霉素具有抗菌谱广的特点，并且价格便宜，因此被广泛用作兽药和饲料添加剂。
为加强兽药残留监控工作，保证动物性食品卫生安全，根据《兽药管理条例》规定，农业部组织修订了《动物性食品中兽药zui高残留*》。我国国家标准《gb 21317-2007 动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法与液相色谱法》、《gb/t 5009.116-2003 畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定 液相色谱法》明确规定可以采用液相色谱法对土霉素、四环素类抗生素进行检测。
在此，我们给大家介绍如何采用液相色谱法分析土霉素、四环素类抗生素，其中，紫外检测器与荧光检测器是常用的检测器，本方案中采用荧光检测器进行检测。土霉素与四环素在0.01-0.5 mg/l浓度范围内校准曲线的线性相关系数均可达到r2=0.9999，线性度良好。
分析方法：
样品：20 μl of std. soln. （0.5 mg/l） 流速: 1.0 ml/min
色谱柱填料：hitachi lachrom c18 （5 μm） 柱温：40 ℃
色谱柱规格：4.6 mm i.d. × 150 mm （p/n: 891-5050） 检测器：荧光检测器
ex 380 nm, em 520 nm
流动相：（a） 咪唑缓冲液*1/ （b） 甲醇 = 17/3
*1咪唑缓冲溶液：（1）将68.08克咪唑、0.37克的乙二胺四乙酸四钠盐二水合物、10.72克乙酸镁四水合物溶于约800毫升超纯水中；（2）用乙酸调节ph=7.2；（3）用超纯水定容至体积为1升。
校准曲线及结构式：
图为 土霉素与四环素的校准曲线及结构式
标样谱图：
图为 土霉素与四环素的标样谱图
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