所需材料
1. tris缓冲液；0.1 m tris ph 8.3，25°c。将 6.75 g tris-hcl 和 8.14 g tris 碱溶解在 900 ml h2o 中。在 25°c 下测定 ph 值。如有必要，用 0.1 m hcl 或 0.1 m naoh 滴定至 ph 8.3。用 h2o稀释至 1000 ml。
2. naoac-nacl缓冲液；0.05 m naoac ph 5，含有 0.1 m nacl。将 14.8 ml 0.2 m hac 和 35.2 ml 0.2 m naoac 以及 100 ml 0.2 m nacl 混合。用 h2o 定容至 200 ml。在 25°c 下滴定至 ph 5。
3. 底物溶液；0.1 m tris ph 8.3 中为 2.5 mm。使用 25 mg 小瓶 n-suc-ala-ala-ala-pna（epc 编号 ns945），用 22 ml tris 缓冲液溶解内容物。（注：使用约 10 ml 缓冲液冲洗底物瓶 5 次。）搅拌溶解。储存于 5°c。
4. 弹性蛋白酶溶液；将 1.0 mg/ml 溶解在 naoac-nacl 缓冲液中。在相同的缓冲液中制备每毫升 0.10 毫克的二级溶液。将两种溶液置于冰浴中保持低温。
程序
1. 将分光光度计调节至 410 nm，池温度调节至 25°c。
2. 将池中 2.5 ml tris 缓冲液和 0.5 ml 底物溶液平衡至 25°。
3. 添加 0.005 ml 0.10 mg ml 弹性蛋白酶溶液，混合并以 1 分钟为间隔测定吸收率的增加率。利率增幅应约为。0.025 – 0.040 δ410nm 每分钟。
比活度的计算
î, 1%, 280 = 19.5 对于猪胰腺弹性蛋白酶
毫克/毫升 = a280x 0.51
体积 = 3.005 ml a=410 nm t=25°c 光程=1.0 cm
8.8=pna在410 nm处的mm消光系数
单位 =δa410x 3.005 毫升
毫克 8.8 x 0.0005 毫克
品牌 elastin products company
猪胰腺弹性蛋白酶多克隆抗体，编号 pr121
抗原：猪胰腺弹性蛋白酶，（epc 号 ec134）
从用纯化的猪胰腺弹性蛋白酶（epc no. ec134）免疫的兔子获得的全血清。