英文名称：alcohol dehydrogenase (adh) assay kit
别名：乙醇脱氢酶试剂盒 adh kit 乙醇脱氢酶（adh）试剂盒
检测方法：微量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
ms1007-100管/96样 索桥生物 100管/96样 ￥550.00元
测定意义：
adh是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物adh主要在肝脏生成，肝脏损伤导致adh释放到血清中。血清adh活性高低反映了肝功能是否异常。
测定原理：
adh催化nadh还原乙醛生成乙醇和nad+，nadh在340nm处有吸收峰，而nad+没有；测定340nm 吸光度下降速率，来计算adh活性。
货号：ms1007 规格：100管/96样
乙醇脱氢酶（adh）活性测定试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
adh是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物adh主要在肝脏生成，肝脏损伤导致adh释放到血清中。血清adh活性高低反映了肝功能是否异常。
测定原理：
adh催化nadh还原乙醛生成乙醇和nad+，nadh在340nm处有吸收峰，而nad+没有；测定340nm 吸光度下降速率，来计算adh活性。
自备实验用品及仪器：
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，室温保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。临用前把试剂三转移到试剂二中，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支，－20℃保存。
试剂四：液体×1支，4℃保存。
粗酶液提取：
组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml试剂一）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；16000g， 4℃离心20min，取上清液置冰上待测。3、血清等液体：直接测定。
adh测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μl蒸馏水、160μl试剂二和20μl试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为a1和a2。△a空白管=a1-a2。
4. 测定管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μl上清液、160μl试剂二和20μl试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为a3和a4。△a测定管=a3-a4。
注意：空白管只需测定一次。
计算公式：
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按照蛋白浓度计算
活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/mg prot) =[(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷(cpr×v样)÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管) ÷cpr
（2）按照样本质量计算
活性单位定义：25℃中每克组织每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/g 鲜重) =[(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷(w×v样÷v样总)÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管) ÷w
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：25℃中每104个细胞每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/104cell) = [(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷(细胞数量×v样÷v样总)÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管) ÷细胞数量
（4）按液体体积计算
活性单位定义：25℃中每毫升血清每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/ml) = [(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷v样÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管)
ε：nadh摩尔消光系数，6.22×103l/mol/cm；d：比色皿光径，1 cm；v反总：反应体系总体积，200μl=2×10-4 l；cpr：上清液蛋白质浓度，mg/ml；w ：样品质量；v样：加入反应体系中上清液体积，20μl=0.02 ml；v样总：提取液体积，1 ml；t：反应时间，1min。
b.使用96孔板测定的计算公式如下
（1）按照蛋白浓度计算
活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/mg prot) =[(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷(cpr×v样)÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管) ÷cpr
（2）按照样本质量计算
活性单位定义：25℃中每克组织每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/g 鲜重) =[(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷(w×v样÷v样总)÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管) ÷w
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：25℃中每104个细胞每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/104cell) = [(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷(细胞数量×v样÷v样总)÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管) ÷细胞数量
（4）按液体体积计算
活性单位定义：25℃中每毫升血清每分钟氧化1μmol nadh 为1个酶活单位。
adh (μmol/min/ml) = [(△a测定管–△a空白管)÷ε÷d×v反总×106] ÷v样÷t
=1.61×(△a测定管–△a空白管)
ε：nadh摩尔消光系数，6.22×103l/mol/cm；d：96孔板光径，0.5 cm；v反总：反应体系总体积，200μl=2×10-4 l；cpr：上清液蛋白质浓度，mg/ml；w ：样品质量；v样：加入反应体系中上清液体积，20μl=0.02 ml；v样总：提取液体积，1 ml；t：反应时间，1min。
注意事项：
上清液蛋白质浓度需要另外测定，建议使用本公司bca蛋白质含量测定试剂盒。配制好的试剂二3天使用完。辅酶ⅰ系列
qs1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样 500
ms1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 微量法 100管/48样 920
qs1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 可见分光光度法 50管/24样 170
ms1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 微量法 100管/48样 330
qs1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 320
ms1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 600
qs1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 450
ms1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 微量法 100管/96样 850
qs1005-50 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 3200
qs1005-25 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 25管/24样 2000
ms1005 柠檬酸合酶(cs）测试盒 微量法 100管/48样 3500
qs1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 720
ms1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 微量法 100管/96样 1400
qs1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 800
ms1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 微量法 100管/96样 1550
qs1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 420
ms1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 微量法 100管/96样 800
qs1010 nad激酶（nadk）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 600
ms1010 nad激酶（nadk）测试盒 微量法 100管/48样 1100
qs1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 紫外分光光度法 25管/24样 1280
ms1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 微量法 100管/96样 2500