rt-pcr（逆转录聚合酶链反应，reverse transcription polymerase chain reaction）是一种常用的分子生物学技术，用于在实验室中检测和扩增rna分子的特定序列。
rt-pcr结合了两种基本的技术：逆转录和聚合酶链反应。逆转录是将rna转录成dna的过程，利用一种特殊的酶称为逆转录酶（reverse transcriptase）。逆转录酶能够将rna作为模板，合成与其相对应的dna，这个dna称为互补dna或cdna。逆转录的结果是将rna分子转化为dna分子，这样就可以使用pcr技术来扩增目标dna序列。
在rt-pcr中，逆转录酶首先与rna模板结合，利用rna上的引物（primer）引导合成cdna链。然后，pcr反应的第二个阶段开始，其中使用dna聚合酶（dna polymerase）和一对dna引物来扩增目标dna序列。pcr通过多次循环的温度变化，使dna链的两个末端的引物与dna模板的特定区域结合，并在每个循环中合成新的dna链。这样，目标序列就被指数级地扩增了。
rt-pcr在分子生物学和医学研究中具有广泛的应用。它可以用于检测和定量rna分子的表达水平，例如研究特定基因的表达模式、分析病毒感染的程度等。此外，rt-pcr还常用于检测和诊断病原体的存在，例如检测病毒、细菌等引起感染的微生物。
在rt-pcr（逆转录聚合酶链反应）中，引物（primers）是起关键作用的短dna片段，用于识别和定向扩增目标rna序列转录的互补dna（cdna）。
引物通常由两个部分组成：前向引物（forward primer）和反向引物（reverse primer）。这两个引物的序列是针对目标rna序列的互补序列设计的，以确保引物与目标序列的特定区域配对。引物的设计需要考虑到几个因素，如引物长度、碱基组成、gc含量、互补性等。