一．实验目的
酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay 简称elisa）是在免疫酶技术（immunoenzymatic techniques）的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,elisa过程包括抗原（抗体）吸附在固相载体上称为包被，加待测抗体（抗原）, 再加相应酶标记抗体（抗原）,生成抗原（抗体）--待测抗体（抗原）--酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体（抗原）的量。待测抗体（抗原）的定量与有色产生成正比。
二．实验原理
用于免疫酶技术的酶有很多，如过氧化物酶，碱性磷酸酯酶，β－ｄ－半乳糖苷酶，葡萄糖氧化酶，碳酸酐酶，乙酰胆碱酯酶，6－磷酸葡萄糖脱氧酶等。常用于elisa法的酶有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酯酶等，其中尤以辣根过氧化物酶为多。由于酶摧化的是氧化还原反应，在呈色后须立刻测定，否则空气中的氧化作用使颜色加深，无法准确地定量。
辣根过氧化物酶（hrp）是一种糖蛋白，每个分子含有一个氯化血红素（protonhemin）区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。氯化血红素辅基的z大吸收峰是403nm，hrp酶蛋白的z大吸收峰是275nm，所以酶的浓度和纯度计算式是（已知hrp的a（1cm 403nm 1%）＝25，式中1％指hrp百分浓度为100ml含酶蛋白1g，即10mg/ml，所以，酶浓度以 mg/ml 计算是hrp的a（1cm 403nm mg/ml=2.5）hrp纯度（rz）=a403nm/a275nm纯度rz（ｒeinheit zahl）值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度hrp的rz值在3.0左右，z高可达3.4。用于elisa检测的hrp的rz值要求在3.0以上。