小鼠肿瘤坏死因子α elisa试剂盒使用说明
【产品用途】：被测样品定性定量分析
【产品规格】：96t/48t（两种规格）
【检测方法】：酶免法/酶联免疫法（elisa）
【保存条件】：2-8℃
【供 货 期】：1-3天（现货供应）
【产品性状】：液体盒装
检测原理：采用双抗体夹心abc-elisa法,保存条件:2-8℃,公司提供代测服务，。
检测范围：96t
3pg/ml-160pg/ml
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含nan3的样品，因nan3抑制辣根过氧化物酶的（hrp）活性。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品（160pg/ml）
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂a液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂b液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
原理
本实验采用abc-hrp方法。用抗大鼠ifn-r单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的ifn-r与单抗结合，高灵敏检测样品中ifn-r的含量。
准备试剂与收集血样
1. 洗涤液：用重蒸水1:25稀释
2. 收集血液标本：采集血清尽早检测，2-8oc保存一天；需更长时间须冷冻（-20 oc）保存，避免反复冻融。
检测程序
1. 建立标准曲线：设标准孔8孔，每孔中各加入样品稀释液100ul，*孔加标准品100ul，混匀后用加样器吸出100ul，移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔，zui后，从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照，第八孔为零孔。
2. 加样：待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。
3. 将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 oc 120分钟。
4. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
5. 每孔（除零孔）加*抗体工作液50ul，置37℃ 60分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔（除零孔）加酶标抗体工作液100ul（两滴），将反应板置37 oc 60分钟。
8. 洗板：同前。
9. 每孔加入底物液a、b各一滴，置37 oc避光反应15分钟。
10. 每孔加入1滴终止液混匀。
11. 在450nm处测吸光值。
结果计算与判断
1. 所有od值都应减除零孔值后再行计算。
2. 以标准品500、250、125、62.5、31.3、15.6、0 pg/ml之od值在双对数纸上作图，画出标准曲线。通过标本的od值可以在标准曲线上查出其浓度。或使用计算机软件，绘制出标准曲线，计算样品含量。
注意事项
1. 以上标准孔及待查样品均建议做复孔，每次测定应同时制作标准曲线。
2. 本试剂盒宜置4oc冰箱保存。有效期6个月。
3. 本试剂盒取出的试剂在室温条件下使用，溶液应轻轻摇匀后使用。
4. 本试剂盒含2m硫酸，不要将它与含*的废物混在一起。
5. 板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。
6. 本试剂盒仅供研究用。