1、需要*保存的细胞株必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将细胞株在 37℃放置太久,否则细胞株会变得浑浊,同时细胞株中的有效成分会被破坏，而影响细胞株质量。如果一次无法用完一瓶,可 将40～45ml分装于无菌50ml离心管中。由于细胞株结冰时体积会增加约10%,因此,细胞株在冻入低温冰箱前，必须预留一 定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
2、一般厂商提供的细胞株为无菌,无需再过滤除菌。如发现细胞株有悬浮物,则可将细胞株加入培养液内一起过滤,切勿直接 过滤细胞株。
3、瓶装细胞株解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的细胞株放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全 部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度 与成分均一,减少沈淀的发生。.切勿直接将细胞株从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而 出现沉淀。
4、热灭活是指56℃, 30分钟加热已*解冻的细胞株.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使细胞株中的补体 成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成细胞株沉淀物显著增多,而且还会影响细胞株的质量.补体 参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞 发生化学趋化和活化。
5、细胞株中的沉淀物 絮状物:主要是细胞株中的脂蛋白变性及解冻后细胞株中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响细胞株本身 的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下小黑点:经过热处理过的细胞株,沉淀物 的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为细胞株受污染。一般情况下,此小黑 点不会影响细胞生长,但如果怀疑细胞株质量,则应立即停止使用,更换另一批号的细胞株。