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液相柱选择的简单思路

2024/3/29 5:48:30发布5次查看
液相柱选择的简单思路:
1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操纵本钱等等。
2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。
3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。
液相柱的使用说明:
( 1 ) 使用前注意事项:
液相柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,一定要注意液相柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10 %左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
( 2 ) 流动相:
流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm 的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的 ph 值适用范围是 2.0-8.0 , bds c18 适合于碱性化合物, ph值适用范围为 2.0-10.0 。当必须要在 ph值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并*置换掉原来所使用的流动相。
( 3 ) 样品:
样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱( spe)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。
保护柱是液相柱的防弹衣,使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度,延长分析柱使用寿命。
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