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日本蟳酚氧化酶的分离纯化及其部分生物化学性质研究

2024/3/28 23:40:32发布7次查看
利用离子交换层析和凝胶过滤层析等方法,从日本好(charybdis japonica)血淋巴中分离纯化出了酚氧化酶,并以l-二羟苯丙氨酸(l—dopa)作为特异性底物对其生化性质和酶性质进行了研究。结果表明,酚氧化酶和酚氧化酶原的分子质量分别为64.5ku和69.5ku。以l—dopa为底物对酚氧化酶纯品进行研究发现,其最适ph值为6.0、最适温度为40℃。对底物l—dopa和儿茶酚的米氏常数km值分别为3.41和7.97mmol/l。该酶对亚硫酸钠、苯硫脲极为敏感,对硫脲、苯甲酸非常敏感,表明该酶很可能是一种儿茶酚酶型的酶。此外,edta,detc,zn^2+,mg^2+和cu^2+均能显著抑制该酶活性,且10mmol/l cu^2+能有效地回复该酶被detc所抑制的酶活性,表明该酶确为一种cu-金属酶。完成机构:中国海洋大学生命科学与技术学部海洋生物系,山东青岛266003
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