基本原理：
1、将特定抗体（一抗）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫性。一抗是待测抗体的抗体，识别待测抗体。
2、二抗是一种与酶偶联的抗体，既保留了其免疫活性，又保留了酶的活性。二抗识别并结合待测抗体。
3、测定时，固定的一抗先与样品稀释液反应，将样品中待测抗体固定；洗涤后再与二抗反应。每一步之间都要进行洗涤。
4、加入底物，酶作用底物，使之变色。底物被酶催化变为有色产物
5、产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。
洗涤不是反应步骤，却是决定成败的关键。目的是洗去反应液中没有与固相抗体结合的物质以及在反应中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
简单来说：
就是将已知抗体固定→加入待测抗体与已知抗体结合→再加入带有酶的二抗与待测抗体结合→加入酶底物，使底物变色。产物颜色的变化∝酶含量∝待测抗体含量，由此间接检测抗体的含量。