1、冷冻前一日前更换半量或全量培养基,观察细胞生长情形。
2、使用sciencell冻存液(货号:0133)混合均匀,置于室温下待用。
3、依细胞传代培养的操作,收集培养好的细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。
4、离心,去除上清液,加入适量冷冻保存溶液,使细胞浓度为1-5 x 10^6 cells/ml,混合均匀,
分装于已标示*之冷冻保存管中,1 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。
5、冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 度10 分钟→ -20 度 30 分钟→ -80 度16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 长期储存。
6、冷冻保存方法2: 冷冻管置于已设定程序之等速降温机中,再放入液氮槽中。
