对氯邻硝基乙酰乙酰苯胺是合成农药精喹禾灵、喹喔啉、精克能的中间体。本文使用液相色谱内标法测定对氯邻硝基乙酰乙酰苯胺的含量．实现了对氯邻硝基乙酰乙酰苯胺及其杂质的有效分离，操作简便，快速，结果重现性好，定量准确。
一、试剂和溶液
甲醇：色谱纯，使用前经0.45um滤膜过滤；
水：新蒸二次蒸馏水；
四氢呋喃：分析纯；
嘧霉胺：没有干扰的杂质峰；
对氯邻硝基乙酰乙酰苯胺标样：已知质量分数>94．6％。
二、仪器
lc-3000液相色谱仪；具可变波长紫外检测器；
ldt230柱温箱；
全中文系统反控工作软件含色谱工作站；
色谱柱： c18（150 mmx4.6mmx5um） ）不锈钢柱；
十万分之一电子天平；
超纯水系统；
过滤器：滤膜孔径约0．45um。
三、液相色谱操作条件
流动相：甲醇+水=65+35（v／v）；流速：1.0ml／min；柱温：30℃；检测波长：252nm；进样体积：5ul；保留时间：对氯邻硝基乙酰乙酰苯胺约6min，嘧霉胺11.1 min。上述液相色谱操作条件，系典型操作参数。可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当调整．以期获得*效果。
对氯邻硝基乙酰乙酰苯胺和嘧霉胺的液相色谱图。