非洲猪瘟**是一种具有囊膜结构的双链dna**，感染家猪和野猪后引起高热、出血和高死亡率。pcr方法由于具备高灵敏度、高特异性和快速的特点，被用于非洲猪瘟**的检测。
下面结合实际操作应用，跟大家分享一套可靠的非洲猪瘟**检测方案。
非洲猪瘟感染组织样本和蜱类样本的前处理
非洲猪瘟易感的对象主要包括家猪，野猪和蜱，通常采集的样品为血液、组织和蜱三类。对于组织样本和蜱，在核酸提取前需要对样本进行充分的破碎，使其核酸充分地释放出来，才能进行后续的检测和诊断。
mm400高通量组织研磨仪可对非洲猪瘟感染动物组织或蜱进行充分破碎、混合、均质化
德国莱驰（retsch）mm400研磨仪可谓是组织样本前处理界的专家，也是各实验室样品粉碎的“多面手”，深受各行业用户的喜爱和信赖。其对于动植物组织的细胞破碎可同时处理多达10、20、48、192个样品，典型样品如：各种动物组织、植物组织、细菌、酵母等样本。研磨中样品管独立且密封，无需担心交叉污染问题，保证您的样本安全。典型研磨时间30s-2min，可处理样品，提高工作效率。
mm400冷冻混合研磨仪
mm400冷冻混合研磨仪部分配件
具体猪瘟感染组织类研磨方案可参考以下步骤
mm400冷冻混合研磨仪实验
猪瘟**的检测——pcr方法
1、研磨后的样品，离心后取上清液200ul，进行核酸纯化；
2、pcr法检测asfv**
现行asfv（非洲猪瘟**）主要实验室检测方式分为asfv**检测和asfv抗体检测。在所有方法其中很受关注的是pcr法，pcr已成功应用于猪样品（血液、器官、肉制品等）和蜱中asfv基因组的检测。asfv为dna**，核酸稳定性高，所有经过验证的pcr技术均可以在活体猪临床症状出现前实现检测。pcr是可以代替**分离鉴定的一种灵敏、特异、快速的asfv 检测技术。同时，相比于抗原检测技术，如酶联免疫吸附试验（elisa），pcr具有更高的敏感性和特异性。pcr技术本身还分为成本较低的普通pcr电泳法和速度更快的实时荧光pcr法（qpcr）。
oie 在《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（2016年）中*使用的常规和实时荧光pcr得到了*的充分验证，是常规诊断的重要工具。引物和探针多以vp72编码区域作为靶基因设计，同样可检测的编码**结构蛋白基因还有p54、k205r等，基因越稳定、在宿主体内复制转录越早则越适合作为pcr靶基因。
对于特急性、急性或亚急性asf感染病例，pcr是优选的检测技术。
德国retsch实验室可为感兴趣的老师提供样机，欢迎垂询！