传统检测单糖、双糖的分析方法有化学法、光谱法、gcms、hplc等方法。其中化学法无法准确测定单种糖的含量；光 谱法的工作繁琐、误差比较大；gc-ms方法需要进行衍生化反 应，前处理复杂，不利于快速分析；hplc法虽然相比其他方法灵 敏度好、检测速度快、适用范围广，但也存在检出限较低、抗干 扰能力差，尤其对于食品中低浓度的单糖、双糖很难进行的 测定，无法满足现阶段对食品检测快速、灵敏、准确的要求。lcms/ms技术通过质谱的高选择性和高灵敏度能够降低目标物的检 出限、提高检测的重现性。
由于糖类为水溶性化合物，在常规的c18色谱柱上没有保留， 而采用其他填料的亲水色谱柱也很难得到太好的峰形或分离度。 因此，选取一款合适的分析糖的色谱柱是液质分析糖的实验关键 点。目前专门测试糖的糖柱通常为液相柱，需要用到100%纯水 相来作为流动相，并且流速通常高于1 ml/min，这样的色谱条件 对于大多数的质谱离子源来说都无法实现化合物的有效离子化， 或者只有通过分流才能实现，但是分流后将损失仪器的检测灵敏 度，失去了使用液质联用仪测试糖的提高灵敏度的目的。
sciex 的 lc-ms/ms液质联用系统的一大特点就是强大的 turbov™离子源技术，离子源的加热能够达到750℃，esi源耐受流速 范围 5 µl/min～3.0 ml/min，apci源耐受流速范围50 µl/ min～3.0 ml/ min，因此可以直接使用hplc糖柱在sciex液质联用仪上进行测试， 即实现了好的分离效果，又提高了检测灵敏度。本实验使用sciex triple quad™ 4500 质谱系统同时测定梨中的葡萄糖、果糖、蔗糖 和*四种糖, 实验方法简单、灵敏度高、选择性好。
实验思路 1. 配制果糖、葡萄糖、蔗糖和*标准曲线，测试四种水溶性 糖的*低检出限； 2. 测试砀山酥梨果实中四种水溶性糖的含量，了解梨中四种糖的 比例关系。
样品处理 1．移取果糖、葡萄糖、蔗糖和*标准品，用纯水稀释，配制 成 50 ng/ml、100 ng/ml、500 ng/ml、1 µg/ml、5 µg/ml 和 10 µg/ml 的标准溶液。 2．梨果实中可溶性糖的提取。
梨果实中糖的提取
材料：砀山酥梨（采集于南京农业大学江浦园艺实验站） 将样品去皮削成小块，液氮速冻后储存于-80冰箱。称取2g样 品，加液氮研磨后，加入80%乙醇7 ml混匀。在37℃水浴中恒温 30 min，超声提取15 min，10000 r/min离心15 min。将上清液移 入25 ml容量瓶。重复提取3次，*后加入80%乙醇定容至25 ml。 取2 ml溶液旋转蒸发，用1 ml水溶解蒸干后的固体，溶解时用超 声波处理，尽量溶解*。溶液离心后，用0.22 µm水系滤膜处 理，即可用于测定。 实验过程中发现此前处理过程提取出的糖样品在液质仪器上 的响应信号过高，*终样品又用纯水稀释10倍和1000倍分别上机 测试。
色谱方法 色谱柱：hi-plex ca, 300×7.7 mm； 流动相：100%纯水洗脱 流速：1 ml/min； 柱温：85℃； 进样量：10 µl
具体可以到资料下载中心下载，谢谢。