试剂准备
1、缓冲液:将缓冲液试剂袋中的试剂倒入量筒(或烧杯)中,溶于500ml蒸馏水中,充分溶解、混匀即可。室温保存。
2、酶试剂:试剂盒中提供的酶试剂可直接使用。用配套的砂轮割开瓶口即可。应在冰箱中0~5℃环境下保存。
3、显色剂:向标有“显色剂”的试剂瓶中加入25ml的缓冲液,充分溶解、混匀即可。室温保存。
4、底物:向标有“底物”的试剂瓶中加入2.5ml蒸馏水,充分溶解、混匀即可。应在冰箱中0~5℃环境下保存。
检测操作步骤
1、样品提取:取2g果蔬样品(叶菜剪成宽度为1厘米左右的菜样,块根菜取1厘米左右的表皮样品)放入三角瓶中,将(1000~5000ul)可调定量加液器刻度调至5.00ml (5000ul),加入两次,共10ml(10000ul)缓冲液,振荡提取(摇动)2分钟后用滤纸在另一三角瓶上干滤,滤出清液即为待测试液。
2、对照测试:在1cm比色皿中,用微量移液器(100μl)加入酶100μl ,将(1000~5000ul)可调定量加液器刻度调至 2.50ml (2500ul),一次加入缓冲液2.50ml(2500ul),混匀,再用另一支100ul的微量移液器加入显色剂100μl ,用20ul的微量移液器加入底物20ul。摇匀后及时放入仪器样品池,按“对照测量”键 进行测试。
3、样品测试:在1cm比色皿中,用微量移液器(100μl)加入酶100μl ,将(1000~5000ul)可调定量加液器刻度调至2.50ml (2500ul),一次加入待测试液2.50ml(2500ul),混匀,静置10分钟后(用计时器计时),再用另一支100μl的微量移液器加入显色剂100μl ,用20μl的微量移液器加入底物20μl 。摇匀后及时放入仪器样品池,按“样品测量”键进行测试。
4、测试结果的判断:样品的抑制率在40%—50%之间为可疑农残超标样品,抑制率大于50%为农残超标样品,抑制率≥40%的样品需要重复检验2次以上,如有必要时,可用气相色谱等方法作进一步确认。
注意事项
1、试剂切勿冷冻至结冰!使用前摇匀试剂,使用时用完一瓶再取一瓶,以防止试剂污染失效,未用完的试剂可用带塞西林瓶封口保存。(按不同环境要求)
2、防止试剂被污染的有效方法:①器具原则:所有用于转移试剂或样品的器具都要,并贴上标志,以免混用造成交叉污染。②试剂“只出不进”原则:每次测试时,从试剂瓶中吸出的试剂不管是否使用,只要吸出,切不可再放回瓶中,否则,容易污染整瓶试剂造成更大损失,甚至影响以后检测,产生错误数据。