分离原理
凝胶过滤填料为三维立体网状结构,由于凝胶网孔大小的限制,大分子将不能进入凝胶颗粒内部(即被凝胶排阻在外),仅能在凝胶颗粒间隙移动,并随缓冲液一起从柱底先行洗脱。小分子可以自由进入并扩散到凝胶颗粒内部,小分子历经的路径更长,将较晚从柱上洗脱。由于样品混合物中各组分的分子大小各异,进入凝胶颗粒内部的程度不尽相同,故经历一段时间的流动并达到动态平衡后,即可按分子由大到小的顺序先后洗脱出来。典型的sec结果如图1所示:图1.sec分离结果历史和分类
1959年第一代的葡聚糖凝胶问世,开启了凝胶过滤纯化的大门。随着技术和原料的革新,相继推出了琼脂糖系列填料及高度交联的琼脂糖和葡聚糖系列填料。不同凝胶过滤填料的特征如下图所示:图2.凝胶过滤介质类别及特征产品介绍
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1.dextran g25
dextran是早期发现的一类填料,可替代ge的sephadex 系列,目前一般主要用于脱盐与缓冲液置换。上样体积可达柱床体积的25-30%,柱床高度一般2-30cm。产品特点
1.比透析速度更快、样品损失大幅降低2.平行处理大量样品,通量更高3.简单易用产品性质
产品测试
样品:bsa蛋白高盐溶液上样量:1ml图3.desalting column g25 m脱盐峰图“
2.geldex pg系列
geldex pg是目前分辨率、选择性最高的凝胶过滤填料,广受用户的欢迎。可替代ge的superdex系列。广泛应用于重组蛋白或天然蛋白的精细纯化阶段。此应用上样体积一般为柱体积的1-5%,且柱床高度要求≥60cm。产品特点:
1.高分辨率、高选择性2.高化学稳定性3.非特异性吸附低4.流速快、硬度大5.回收率高6.易于放大产品性质
产品测试
样品:igg(150kd)、牛血清白蛋白(66.4kd)、样品20(35kd)3个的蛋白抗体混合溶液3ml,浓度3.175mg/ml。平衡缓冲液:pbs缓冲液。图4.翌圣geldex 75 pg chromatography column纯化峰图图5.进口某品牌对照产品纯化峰图
图6:国内其他品牌对照产品纯化峰图
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3.空柱
yxk16/26层析空柱是为广大用户精心设计的实验室型低压层析空柱,能方便的连接到 akta 等层析系统上。此规格的空柱常用于凝胶层析介质的装填。产品特点:
1.使用方便、操作容易;2.倒翻口接口设计以及高弹性密封圈有效防止渗漏;3.柱头液流分布均匀,容易装出高柱效的层析柱;4.外配有恒温夹套,方便层析过程的温度控制。“
4.装柱器
16/26装柱器是yxk16/26层析柱的一个配件,常用于凝胶层析介质的装填,让装柱更简便。产品订购
产品名称 产品编号 规格 价格(元)
dextran g25 m葡聚糖g25中粒 20591es25/60 25g/100g 500/1600
desalting column g25 m脱盐柱g25中 20590es03/10 5 ml/ 10x5 ml 400/3500
spin desalting column, 0.5ml离心脱盐柱, 0.5ml 20599es08/20 5个/盒/ 20个/盒 385/1425
geldex 30 pg高分辨琼脂糖凝胶层析填料(3-10 kda) 20596es60/76 100ml/500ml 3600/15000
geldex 75 pg高分辨琼脂糖凝胶层析填料(3-70 kda)
20597es60/76 100ml/500ml 3600/15000
geldex 200 pg高分辨琼脂糖凝胶层析填料(10-600 kda) 20598es60/76 100ml/500ml 3600/15000
geldex 75 pgchromatography column凝胶层析75pg预装柱 20592es03 1套 16000
geldex 200pgchromatography column凝胶层析200 pg预装柱 20593es03 1套 16000
yxk16/70层析空柱 20443es03 16 mm×70 cm 3200
yxk16/100层析空柱 20444es03 16 mm×100 cm 3600
yxk26/70层析空柱 20445es03 26 mm×70 cm 3600
yxk26/100层析空柱 20446es03 26 mm×100 cm 4000
16 mm装柱器 20447es03 16 mm 1800
26 mm装柱器 20448es03 26 mm 1800
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