*根据《食品标签标准》,低分子量水溶性膳食纤维是指色谱图中保留时间早于红色虚线位置(麦芽三糖的洗脱位置)的纤维。
前处理方法
1.将 5 ml饮料样品溶解在45 ml 0.08 m 磷酸盐缓冲液(ph 值 6.0)中。
2.加入 0.2 ml α-淀粉酶,确认 ph 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 ph 值为 6.3。
3.放入沸水浴中,在 90 ℃ 下振荡反应 30 分钟。
4.冷却后,加入 0.2 ml 蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶溶液,确认 ph 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 ph 值为 6.3。
5.在 60 ℃ 下振荡反应 30 分钟。
6.放入沸水浴中,在 100 ℃ 下加热 10 分钟。
7.冷却后,加入 3 ml用水稀释 10 倍的甘油。
8.用水定容至100 ml,制成酶处理溶液。
9.将 50 ml 酶处理液以 50 ml/h 的速度通过*离子交换树脂。 *amberlite™ ira-67 和 amberlite™ 200ct(杜邦)各25 ml 混合。
10.将约 150 ml 水通过第9步的离子交换树脂 (总流出液:200 ml)。
11.在旋转蒸发仪中浓缩。
12.加水定容至 20 ml 。
13.用 0.45 µm 膜过滤器过滤,作为hplc 样品。
sample: 20 μlpretreated beverage containing indigestible dextrin
1.dietary fiber fraction
2.glucose
3.glycerin (internal standard)
column
:shodex ohpak lb-g 6b (6.0 mm i.d. x 100 mm) + lb-802.5 (8.0 mm i.d. x 300 mm) x 2
eluent
:h2o
flow rate
:0.5 ml/min
detector
:ri
column temp.
:80 ℃
