基底胶的使用方法:
1、培养细胞时可无需稀释直接包被,包被厚度可为0.5 mm(薄层)或1.0 mm(厚层)。matrigel也可以在无血清培养基中稀释后用于包被培养器皿表面,根据细胞类型和应用目的确定相应matrigel浓度。
2、matrigel在10℃以上即可成胶,在操作过程中,保持matrigel一直置于冰上,所有接触matrigel的细胞培养器皿,移液吸头,分装管等都必须预冷后使用。
3、matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色),是由于酚红和碳酸氢盐与co2 作用引起的,与5%co2 平衡后色差即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使matrigel 分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行,试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证matrigel呈匀浆状。
4、解时可将matrigel 基质置于4℃冰箱内冰上过夜溶解。成胶后的matrigel可以在4℃ 24-48h后重新呈液态。
基底胶的应用:
基底胶可形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,基底胶还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。不同配方的基底胶可以满足不同的实验要求。
