1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加hrp conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(od值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
phospho-androgen receptor (ser515)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-androgen receptor (ser791)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-androgen receptor (ser94)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-androgen receptor (tyr363)磷酸化雄激素受体抗体
ankk1锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ankk1抗体
phospho-alpha adducin (thr445)磷酸化内收蛋白抗体
annexin a11膜粘连蛋白11抗体
annexin a13膜粘连蛋白13抗体
phospho-acth (ser168)磷酸化促肾上腺皮质激素acth抗体
phospho-akt1 (ser246)磷酸化蛋白激酶akt1抗体
phospho-akt1/3 (tyr473)磷酸化蛋白激酶b抗体
phospho-alpha 1 sodium potassium atpase (tyr260) 磷酸化钠钾atp酶蛋白a1抗体
phospho-alpha adducin(ser436)磷酸化内收蛋白a1抗体
phospho-ampk alpha 1 (ser487)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
phospho-ampk alpha 2 (ser345)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
asah1酸性神经酰胺酶1抗体
adrm1粘附调节分子1抗体
aphrodisin气味结合蛋白抗体
aldh2乙醛脱氢酶2抗体
annexin a10膜粘连蛋白10抗体
anterior gradient 2前梯度同源蛋白2抗体
aldh1b1乙醛脱氢酶5抗体
alf通用转录因子iia样因子抗体
atg4d自噬相关蛋白4d抗体
atg9a自噬相关蛋白9a抗体
aldolase c醛缩酶c抗体
aspartate aminotransferase谷草转氨酶抗体
abcg5三磷酸腺苷结合转运蛋白g超家族成员5抗体
abcg8三磷酸腺苷结合转运蛋白g超家族成员8抗体
acadl酰基辅酶a脱氢酶长链抗体
acadm酰基辅酶a脱氢酶中链抗体
acads酰基辅酶a脱氢酶短链抗体
