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茶树农杆菌转化系统和基因枪转化系统的优化

2024/2/29 10:06:12发布27次查看
在用农杆菌浸染前,将茶树外植体预培养在含有pvp(po1yvinylpyrro1idone,16g/l)的预培养基上2-3d可提高转化频率。优化后的茶树基因枪转化体系,即制弹程序:60mg/1m1钨粉悬浮液10μ1中加入1.6μ1质粒dna(1μg/μ1),再分别加入0.1mol/l的亚精胺4μ1,2.5mol/l的cacl2l5μ1,最后定容至48μ1;每次轰击上样量为8—10μ1。基因枪转化后抗性筛选2个月,抗性愈伤组织存活率为5.0%—12.1%。完成机构:浙江大学茶叶研究所,浙江杭州310029
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